顯微鏡行業(yè)*德國(guó)徠卡顯微鏡2014年技術(shù)

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三維定位顯微鏡的新型超分辨率系統(tǒng)

05 九月 2013

Leica SR GSD 3D - 三維單分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的高度和可重復(fù)的定位

德國(guó)韋茨拉爾。超分辨率是光學(xué)顯微鏡的大勢(shì)所趨。徠卡擴(kuò)展了其超高分辨率顯微鏡產(chǎn)品組合，現(xiàn)已推出了Leica SR GSD 3D，一個(gè)同時(shí)能為分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)提供二維和三維超分辨率成像的廣角系統(tǒng)。寬視場(chǎng)熒光顯微鏡采用了GSD（基態(tài)耗盡）ordSTORM技術(shù)，達(dá)到了橫向20納米、軸向50nm的分辨率。Leica SR GSD 3D也以其在定位單分子、其系統(tǒng)穩(wěn)定性及其光學(xué)性能方面*的性贏得好評(píng)。這些屬性對(duì)于在很短的時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生可重現(xiàn)性的高品質(zhì)結(jié)果是*的。Leica SR GSD 3D的優(yōu)勢(shì)通過(guò)全自動(dòng)系統(tǒng)和軟件的簡(jiǎn)單操作而實(shí)現(xiàn)的。

Leica SR GSD3D配備了專門為超高分辨率顯微鏡開發(fā)的160倍的高性能物鏡。其設(shè)計(jì)進(jìn)行了優(yōu)化，可用于高功率激光輻射。極低的自體熒光保證了較高的信噪比，這對(duì)于單分子檢測(cè)應(yīng)用是頗為理想的。為了能在z向上進(jìn)行分子定位，即焦平面的上方和下方，Leica SR GSD 3D采用了像散效果。像散實(shí)際上是一種像差，但卻是特意用柱面透鏡創(chuàng)造出來(lái)的。對(duì)應(yīng)的圖像能夠確定檢測(cè)到的分子的z位置，從而實(shí)現(xiàn)三維重建。為了保證結(jié)果的可重復(fù)性，柱面透鏡能地定位到光路中，只要該系統(tǒng)從二維切換到三維錄制-不是用手，而是用鼠標(biāo)點(diǎn)擊通過(guò)軟件控制來(lái)自動(dòng)完成。

Leica SR GSD 3D已以多種方式進(jìn)行了優(yōu)化，可產(chǎn)生可靠的定位結(jié)果。所有的光學(xué)元件在復(fù)消色差方面均進(jìn)行了修正，達(dá)到了較高的徠卡標(biāo)準(zhǔn)。在此基礎(chǔ)上，該軟件使系統(tǒng)能進(jìn)行的校準(zhǔn)，對(duì)x、y和z中的分子進(jìn)行定位。 除了用黃金珠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的校準(zhǔn)外，也可用樣本的熒光珠或染料分子進(jìn)行特定顏色的校準(zhǔn)。特殊的SuMo技術(shù)（SUpressed MOtion）確保檢測(cè)過(guò)程中漂移量zui低，穩(wěn)定性zui高。

“對(duì)具備納米級(jí)分辨率的細(xì)胞結(jié)構(gòu)進(jìn)行三維觀察可以讓科學(xué)家們?cè)谏镝t(yī)學(xué)研究中獲得新的見解，”徠卡公司的廣角成像主管Sebastian Tille解釋說(shuō)。“比如，新型Leica SR GSD 3D是一個(gè)*的工具，能更好地了解分子結(jié)構(gòu)或細(xì)胞蛋白輸運(yùn)過(guò)程。專家已經(jīng)確認(rèn)了*批測(cè)試之后新系統(tǒng)出色的性能和可靠性。

Leica SR GSD 3D是基于一個(gè)全自動(dòng)的TIRF系統(tǒng)（全內(nèi)反射熒光），允許超分辨率與TIRF顯微鏡相結(jié)合。該系統(tǒng)也可用于活細(xì)胞或先進(jìn)的熒光顯微鏡的各個(gè)領(lǐng)域中的各種應(yīng)用。作為一個(gè)多功能系統(tǒng)，Leica SR GSD 3D使研究人員可以按其所需自由地將系統(tǒng)進(jìn)行地定制。GSD技術(shù)的另一個(gè)重要的優(yōu)點(diǎn)是，它可與標(biāo)準(zhǔn)的熒光標(biāo)記共同使用。Leica SR GSD 3D是Leica SR GSD的升級(jí)版，多次受到專家委員會(huì)的認(rèn)可，如獲得的R＆D100大獎(jiǎng)。

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